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基因工程的诞生
1972年,美国斯坦福大学的P.Berg博士领导的研究小组,率先完成了世界上第一次成功的DNA体外重组实验,并因此与W.Gilbert、F.Sanger
分享了1980年度的诺贝尔化学奖。Berg等人使用核酸内切限制酶EcoRI,在体外对猿猴病毒SV40的DNA和λ噬菌体的DNA分别进行酶切消化,然后再用T4
DNA连接酶将两种消化片段连接起来,结果获得了包括SV40和λDNA 的重组的杂交DNA分子。
1973年,斯坦福大学的S.Cohen等人也成功地进行了另外一个体外DNA重组实验。他们将编码有卡那霉素(kanamycin)抗性基因的大肠杆菌R6-5质粒,和编码有四环素(tetracycline)抗性基因的另一种大肠杆菌质粒pSC101
DNA混合后,加入核酸内切限制酶EcoRI,对DNA进行切割,而后再用T4 DNA连接酶将它们连接成重组的DNA分子。用这种连接后的DNA混合物转化大肠杆菌,结果发现,某些转化子菌落的确表现出既抗卡那霉素又抗四环素的双重抗性特征。
S.Cohen的工作,是第一次成功的基因克隆实验,其重要意义在于:它说明了像pSC101这样的质粒分子是可以作为基因克隆的载体,能够将外源的DNA导入寄主细胞。
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